משבש תאים הוא מכשיר ניסוי נפוץ המשמש לפירוק תאים ביולוגיים ולשחרור חומרים תוך תאיים.עקרון העבודה של מפסק התאים מבוסס על עקרון השבירה הפיזיקלית והתנודה המכנית, ומטרת שבירת התאים מושגת על ידי מתן מספיק אנרגיה להרוס את מבנה התאים.
עיקרון העבודה של משבש התא יוצג בפירוט להלן.המרכיבים העיקריים של משבש התא כוללים בקר מהירות, תא ריסוק, כדור ריסוק וצינור דגימה ועוד. ביניהם, בקר המהירות משמש לשליטה על מהירות הסיבוב של תא הריסוק המהווה מיכל לאחסון דגימות וכדורי ריסוק, וכדורי הריסוק שוברים תאים על ידי התנגשות בדגימות.לפני השימוש במשבש התא, יש לבחור תחילה את המדיום המתאים.אמצעי ריסוק נפוץ הם חרוזי זכוכית, חרוזי מתכת וחרוזי קוורץ.
השיקולים העיקריים בבחירת מצע ריסוק הם אופי המדגם ומטרת הריסוק.לדוגמה, עבור תאים שבירים, חרוזי זכוכית קטנים יותר יכולים לשמש להפרעה;עבור תאים קשים יותר, ניתן לבחור חרוזי מתכת קשים יותר.במהלך תהליך הריסוק, הכניסו את הדגימה המיועדת לכתישה לתוך פח הריסוק, והוסיפו כמות מתאימה של חומר ריסוק.לאחר מכן, מהירות הסיבוב של תא הריסוק נשלטת על ידי בקר המהירות, כך שלמדיום הריסוק והדגימה יש התנגשות מכנית מתמשכת.התנגשויות אלו עלולות לשבש את מבנה התא באמצעות העברת אנרגיה, פירוק קרומי התא ואברונים ושחרור חומרים תוך תאיים.
תהליך העבודה של משבש התאים כולל בעיקר את גורמי המפתח הבאים: מהירות סיבוב, גודל וצפיפות מצע הריסוק, זמן ריסוק וטמפרטורה.הראשון הוא מהירות הסיבוב.יש להתאים את בחירת מהירות הסיבוב בהתאם לסוגי תאים שונים ולמאפייני המדגם.
באופן כללי, עבור תאים רכים, ניתן לבחור במהירות סיבוב גבוהה יותר כדי להגביר את תדירות ההתנגשויות ובכך לשבש את התאים בצורה יעילה יותר.עבור תאים קשיחים יותר, מכיוון שהם עמידים יותר, ניתן להפחית את מהירות הסיבוב כדי להפחית את ההפרעה בדגימה.
השני הוא גודל וצפיפות מצע הריסוק.הגודל והצפיפות של המדיום לריסוק ישפיעו ישירות על אפקט הריסוק.מדיה משבשת קטנה יותר יכולה לספק יותר נקודות התנגשות, מה שמקל על שיבוש מבנים סלולריים.חומרי ריסוק גדולים יותר דורשים זמן ריסוק ארוך יותר.
בנוסף, צפיפות מצע הריסוק תשפיע גם על עוצמת ההתנגשות, צפיפות גבוהה מדי עלולה להוביל לפיצול יתר של המדגם.זמן השיבוש הוא פרמטר חשוב לשיבוש התא.בחירת זמן הריסוק צריכה להיקבע בהתאם לסוג המדגם ואפקט הריסוק.בדרך כלל, ככל שזמן ההפרעה ארוך יותר, כך התאים מופרעים בצורה יסודית יותר, אך זה יכול גם לגרום נזק לחלקים אחרים של הדגימה.האחרון הוא בקרת טמפרטורה.לא ניתן להתעלם מהשפעת הטמפרטורה על פיצול התא.טמפרטורה גבוהה מדי עלולה לגרום לדנטורציה של חלבונים וחומצות גרעין בתאים, ובכך להשפיע על אפקט הפרגמנטציה.לכן, מומלץ לבצע שיבוש תאים בתנאים קריוגניים, אותם ניתן להפחית באמצעות שימוש בצ'ילר או הפעלה על קרח.
משבשי תאים ממלאים תפקיד חשוב במחקר ביולוגי.על ידי שליטה סבירה בפרמטרים כגון מהירות סיבוב, גודל וצפיפות של תווך ריסוק, זמן ריסוק וטמפרטורה, ניתן להשיג ריסוק יעיל של תאים.לאחר שבירת התאים, ניתן להשיג סוגים שונים של חומרים בתאים כמו חלבונים, חומצות גרעין, אנזימים ועוד, המהווים הנחת יסוד חשובה לניתוח ומחקר בהמשך.בקיצור, משבש התא הוא מכשיר ניסיוני חשוב, ועקרון העבודה שלו מבוסס על עקרון השבירה הפיזיקלית ורטט מכני.ניתן להשיג שיבוש יעיל של תאים על ידי שליטה בפרמטרים שונים כגון מהירות סיבוב, גודל וצפיפות של מדיום השיבוש, זמן השיבוש והטמפרטורה.משבש התא נמצא בשימוש נרחב, המספק נוחות ותמיכה לחוקרים במחקרים קשורים בתחום הביולוגיה.
זמן פרסום: 06-06-2023